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標(biāo)本的搜集是成功進(jìn)行elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)重要基礎(chǔ),我司為您揭秘ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)標(biāo)本的搜集以及常見問題的解析。
實(shí)驗(yàn)標(biāo)本搜集:
1)標(biāo)本搜集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn),若不能馬上進(jìn)行實(shí)驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)防止反復(fù)凍融。
2)血清:運(yùn)用不含熱原的試管,操作過程中防止任何細(xì)胞刺激,搜集血液后,3000轉(zhuǎn)離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心腸別離。
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3)血漿:3000轉(zhuǎn)離心30分鐘取上清。
4)細(xì)胞上清液:3000轉(zhuǎn)離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
5)組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎,3000轉(zhuǎn)離心10分鐘取上清。
6)保存:假如樣本搜集后不及時(shí)檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,防止反復(fù)凍融,在室溫下解凍并保證樣品均勻地充沛解凍。
ELISA試劑盒常見問題解析:
1.加樣量紛歧致?
解決方法:樣品稀釋前應(yīng)充沛混勻,盡可能運(yùn)用同一移液器并裝緊吸嘴。
2.樣品數(shù)量多少紛歧,加樣時(shí)刻有長有短?
解決方法:重復(fù)某一樣品時(shí),加樣時(shí)刻盡可能與*次接近。
3.保溫時(shí)刻紛歧致,洗刷條件紛歧致,操作人員紛歧致?
解決方法:重復(fù)測定標(biāo)本,操作條件、人員等應(yīng)盡可能與前次保持一致,以掃除這些要素造成的紛歧致的可能性。
引起ELISA測定過錯(cuò)成果的原因主要有:
①標(biāo)本要素;
②試劑要素;
③操作要素。
ELISA方法被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體測定。但ELISA測定中影響要素較多,而且其操作中有必定的技術(shù)要求,在檢測過程中除正常反響外,有經(jīng)常見到一些過錯(cuò)的成果。